接下來(lái)喆圖小編就來(lái)給大家講講關(guān)于凍存的細(xì)胞如何做前處理及培養(yǎng)。

  首先當(dāng)我們收到包裝箱后，立即將凍存細(xì)胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快，以避免升溫。不要將細(xì)胞儲(chǔ)存在-60℃的低溫冰箱中，這樣會(huì)對(duì)細(xì)胞造成不可挽回的傷害。

接下來(lái)是培養(yǎng)細(xì)胞的關(guān)鍵：

  (1) 將一管細(xì)胞從液氮罐中取出，注意保護(hù)手和眼睛。

  (2) 將凍存管快速的放入37℃的電熱恒溫水浴鍋中，輕輕握住并旋轉(zhuǎn)，直到管內(nèi)物體*融化。

  (3) 將凍存管立即從電熱恒溫水浴鍋中拿出，擦干，轉(zhuǎn)入無(wú)菌環(huán)境。

  (4) 用70％的酒精沖洗凍存管，然后擦去多余酒精。

  (5) 打開蓋子，注意手指不要碰到里面的螺紋（注意，由于凍存管有負(fù)壓，開蓋時(shí)可能會(huì)有少量溢出，這是正?，F(xiàn)象）。

  (6) 用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶。多數(shù)細(xì)胞推薦的接種密度為每平方厘米6000個(gè)細(xì)胞。

  (7) 蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子，輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要?dú)怏w交換可打開蓋子。

  (8) 將培養(yǎng)瓶放入CO2培養(yǎng)箱中37℃恒溫培養(yǎng)。

  (9) 放入CO2培養(yǎng)箱后第6-16小時(shí)更換一次培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞。

  以上內(nèi)容僅供參考，一些細(xì)胞類型像神經(jīng)細(xì)胞，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和一些生長(zhǎng)緩慢的上皮細(xì)胞，不推薦擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存。其它的細(xì)胞類型像成纖維細(xì)胞、星形細(xì)胞、腎系膜細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞等等，可以擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存，如需了解詳情請(qǐng)聯(lián)系喆圖客服！